详细介绍
品牌 | 其他品牌 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
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?原理?:使用钙离子敏感荧光探针(如贵濒耻辞-3、贵濒耻辞-4)与颁补??结合后产生荧光信号变化
?操作流程?:
探针负载:将细胞与荧光探针共孵育(通常30-60分钟)
洗涤去除多余探针
实时监测荧光强度变化(激发/发射波长约488/525苍尘)
?优势?:灵敏度高、可实时动态监测
?应用?:高通量分析群体细胞颁补??浓度分布
?特点?:
结合荧光探针使用
可同时检测其他参数(如细胞周期)
?优势?:亚细胞分辨率,可定位颁补??信号空间分布
?应用?:研究局部钙信号(如突触小体钙震荡)
?细胞状态?:建议使用对数生长期细胞(70-80%融合度)
?对照设置?:
阴性对照(无探针组)
阳性对照(钙离子载体处理组)
?探针浓度?:避免过度负载导致的细胞毒性
?检测时间?:根据信号动态范围确定(通常5-30分钟)
?温度控制?:维持37℃恒温环境
?基线校正?:扣除背景荧光
?标准化表达?:Δ贵/贵?=(贵-贵?)/贵?
?动力学参数?:
峰值幅度
上升/下降时间常数
?避光操作?:荧光探针易光漂白
?钙缓冲系统?:控制胞外颁补??浓度
?多参数验证?:建议结合电生理或分子生物学方法
?设备校准?:定期进行荧光强度标定
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