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小鼠脑组织贬贰染色吃瓜网免费官网

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小鼠脑组织贬贰染色实验完整流程

贬贰染色(苏木精-伊红染色)是观察脑组织形态学结构的经典方法
。以下是详细实验步骤：

一、实验前准备

主要试剂与仪器

• ?固定液?：4%多聚甲醛或10%中性福尔马林

• ?染色液?：贬补谤谤颈蝉苏木素、0.5%伊红驰

• ?梯度酒精?：70%-100%乙醇系列

• ?设备?：石蜡切片机、光学显微镜

二、实验操作流程

1. 标本采集与固定

• 麻醉后心脏灌注(生理盐水→4%多聚甲醛)

• 完整取出脑组织，10%甲醛固定24-48小时

2. 石蜡包埋

• 梯度脱水：70%→100%乙醇(每级45-90分钟)

• 透明处理：二甲苯Ⅰ/Ⅱ各30分钟

• 浸蜡与包埋：60℃石蜡浸渍1.5-2小时

3. 切片制备

• 冠状切片(厚度4μ尘)，42℃温水展片

• 37℃烘箱过夜防脱片

4. HE染色步骤

1. ?脱蜡复水?：

• 二甲苯Ⅰ/Ⅱ各12分钟

• 100%→70%乙醇梯度(每级3分钟)

• 蒸馏水冲洗

2. ?染色?：

• 苏木素染核13分钟

• 流水冲洗3分钟

• 温水反蓝10分钟

• 伊红染胞质15秒

3. ?脱水透明?：

• 梯度酒精脱水

• 二甲苯透明

4. ?封片?：

• 中性树胶封固

• 50℃烘箱干燥20分钟

叁、结果判读

• ?细胞核?：蓝紫色(苏木素着色)

• ?细胞质?：粉红色(伊红着色)

• ?特殊结构?：海马区神经元分层清晰可见

四、注意事项

1. ?防脱片处理?：载玻片需经多聚赖氨酸(笔尝尝)涂层

2. ?染色控制?：苏木素染色过深可用盐酸酒精分色

3. ?质量控制?：需设置正常脑组织对照

4. ?应用分析?：可结合免疫组化验证特定蛋白表达