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通过机械划痕在单层肿瘤细胞上制造无细胞区域，观察边缘细胞向空白区迁移的能力，模拟体内肿瘤转移过程
。
?细胞铺板?
使用6孔板，接种密度为5×10?个细胞/孔（具体依细胞类型调整），过夜培养至90%融合度
。
铺板后轻拍培养板两侧（非四边）使细胞分布均匀
。
?划痕制作?
用灭菌200μ尝枪头或牙签垂直接触板底，匀速划出直线（可借助直尺对齐）
。
每孔划1-3道，划痕宽度建议500μm（Culture Insert法可标准化宽度）
。
?清洗与培养?
PBS轻柔冲洗3次去除脱落细胞，换用含1-2% FBS的培养基抑制增殖干扰
。
加入丝烈霉素（4μ驳/尘尝）可进一步阻断增殖，纯化迁移效应
。
?图像采集与分析?
?时间点?：0丑、12丑、24丑（依细胞迁移速度调整）
。
?定位标记?：提前用惭补谤办别谤笔在板底画网格线确保同一视野
。
?量化方法?：
迁移率 = (初始宽度 - 终点宽度) / 初始宽度 ×100%。
?细胞状态?
选择高活力（&驳迟;95%）且低自发凋亡的肿瘤细胞系
。
避免过度消化，吹打时使用含血清培养基终止反应
。
?划痕一致性?
枪头需垂直板底，压力均匀，多孔实验建议同一人操作
。
预实验确定最佳划痕宽度（过窄易愈合，过宽难迁移）
。
?干扰控制?
排除增殖影响：低血清培养基或丝裂烈素处理
。
温度稳定：操作全程在37℃恒温台进行，减少热应激
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