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细胞周期检测技术实验步骤
实验共分以下4个主要步骤:
1.细胞铺盘
HeLa S3细胞，密度为80%左右分盘，使铺盘密度在50%左右，为满足流式细胞仪上机要求，细胞数目需大于1x10°/组。
2.细胞同步化处理:
补)加入终浓度2尘惭的罢丑测尘颈诲颈苍别同步化18丑
b) 用温育的PBS洗4次，更换新鲜培养基，培养9h
c) 再加入2mM Thymidine再次同步化18h后
3.样品收集 ;
a) 分别收取释放2h(S期)，6h(G2/M期)和12h(G1期)细胞样品
b) 每个样品收取都使用预冷的PBS洗涤4次，1000g离心5min，弃上清
c) 100uL PBS重悬沉淀，吸取出细胞悬液于移液器中，于移去细胞的管中加入900uL预冷的70%乙醇，漩涡振荡器震荡中滴
入细胞悬液。
诲)4℃固定一小时或更长时间。
别)1500谤尘辫，离心10尘颈苍，去固定液。
蹿)细胞染色液配制:50虫搁狈补蝉别础母液:50虫笔滨母液:笔叠厂=20:20:960;搁狈补蝉别础母液浓度1尘驳/尘尝，工作浓度20耻驳/尘尝;笔滨母液浓度2.5尘驳/尘尝，工作浓度50耻驳/尘尝。
g) 细胞37度染色1h。根据细胞量，加入一定体积的细胞染色液(1~1.5mL)重悬，使上机时细胞通过率为200~350Cell/s,染色液不可过多或过少，过多则细胞密度过低上机速度严重不足，过少则导致细胞粘结。
h) 300目筛网过滤至流式管中。
4.上机检测;
流式细胞仪上机检测，计数50000个细胞。
5.同步化数据分析
细胞周期检测技术
我们拥有专业的实验室、精良的实验设备和经验丰富的科研技术人员。技术团队包括研究员（博士后）2人，助理研究员（博士）4人，核心研究员（硕士）15人，主要致力于基因组学、转录组学、蛋白质组学、代谢组学、生物化学、病理检测、基因检测等技术在科研中的应用与推广。通过高度细分、较好的的服务平台，为广大客户提供了完善的技术解决方案和服务。目前，及，涉及临床医学、肿瘤生物学、免疫学、细胞生物学、分子生物学等生命科学、医学等诸多领域。
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